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Cell Imaging
Cell Imaging-Techniken, die es erlauben, die Zelle als kleinste lebens fähige
Einheit zu untersuchen und komplexe Vorgänge im Inneren der Zelle oder
eines Zellverbundes sichtbar zu machen, werden immer ausgefeilter. Neben
der klassischen Licht-, Fluoreszenz- und Elektronen mikroskopie, die z. B.
Untersuchungen zur Zellstruktur oder zur Expression und Lokalisation
markierter Proteine in fixierten Zellen ermöglichen, können heute durch
vielfältige Kombinationen von genetischen und biochemischen Methoden
physiologische Prozesse in lebenden Zellen und sogar Organellen sowie
einzelne Proteine live erfasst werden.
Vera Göser und Michael Hensel beobachten mithilfe Selbstmarkierender
Enzyme (SME), wie sich während einer Salmonella-Infektion bakterielle
Effektorproteine in der Wirtzelle ausbreiten.
Katharina König, André Gemeinhardt und Vahid Sandoghdar verfolgen live
mit der iSCAT-Mikrokopie die Sekretierung und Diffusion von Proteinen in
einer Zelle. Und das nicht-invasiv und ohne Marker.
Mareike Rüder, Wiebke Milani und Sven Bogdan können mit einer
Kombination aus Structured illumination microcopy (SIM) und Spinning
Disk-Lebendzellmikroskopie die Migration von Drosophila-Makrophagen bei
der Wundantwort quantitativ erfassen.
Service
Aktuell: High Content Cell Imaging
Während in der klassischen Mikroskopie die Zellen fixiert werden müssen, was Zerstörungen und Artefakte mit sich bringt, können mit Fluoreszenz-basierten Mikroskopiemethoden, z. B. der laser scanning-Mikroskopie, lebende Zellen viel realistischer beobachtet werden. Dabei wird der Erkenntnisgewinn enorm erweitert, da nicht nur eine exakte Lokalisation von spezifischen Proteinen oder Nukleinsäuren in der Zelle bestimmt werden kann, sondern auch deren Bewegungen und Interaktionen in einer intakten, lebenden Zelle. Durch die resolution Evolution, bei der die Auflösungsgrenze drastisch nach unten verschoben wurde, z. B. mit der stochastic optical reconstruction microscopy (dSTORM), können sogar einzelne Moleküle in lebenden Zellen erfasst werden. Jan Schlegel und Markus Sauer zeigen in ihrem Beitrag, wie man mit der 3D-Gitter-Lichtblatt-dStorm-Technologie die Verteilung des Adhäsionsrezeptors CD56 in der Plasmamembran visualisieren kann. Anne Schlaitz wendet die konfokale laser scanning-Methode an, um in lebenden Zellen die Dynamik des ERs während der Mitose zu erforschen. Tobias Becker und Pavel Kielkowski stellen in ihrem Artikel eine Pronukleotid-Sonde für das in situ fluorescence Imaging zur Identifizierung und Beobachtung von AMPylierten Proteinen vor. Hintergrundbild: Sich teilende HeLa-Zellen unter dem Lichtmikroskop. Chromosomen im Zellnukleus (lila), Mikrotubuli im Zellskelett (Tubulin, grün) und Aktin (rot) sind erkennbar. Bild: Kevin Mackenzie, University of Aberdeen, Wellcome Collection, https://wellcomecollection.org/works/vjq5c26rCC unter der Lizenz BY 4.0, https://creativecommons.org/licenses/by/4.0.
Nukleinsäure-Extraktion im Hochdurchsatz
Weitere Informationen unter: www.himedialabs.com